分光光度計是實驗室里常用的一種理化分析儀器，本文就分光光度計在使用過程中出現(xiàn)的幾個常見問題，如儀器的預熱、波長準確度的檢查與校正、吸收池的使用方法、吸光度測定重復性等問題進行分析，并提出解決這些問題的適宜方法。

　　1關于儀器的預熱問題

　　在一般分光光度計的使用說明書上，要求儀器預熱時間約20分鐘；若是帶微處理器的分光光度計，開機后儀器自動進入自檢 (初始化 )狀態(tài)，約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個環(huán)節(jié)上，很多使用者或多或少存在問題，如開機只預熱電路系統(tǒng) (不調(diào)節(jié)波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等等。

　　對帶微處理器有自檢功能的分光光度計，開機后儀器自檢 (初始化)結(jié)束后，在測定窗口上，設置所需波長值， 用一個吸收池裝上純凈水置于光路上，調(diào) “0000A”后，預熱 儀器，當儀器顯示讀數(shù)不再變化后即可進行測定。

　　對于紫外可見分光光度計，由于有雙光源 (鎢燈與氘燈)， 為了延長燈的使用壽命，開機自檢完成后可以關掉測定時不用的光源燈。

　　2關于波長準確度的檢查與校正

　　日常在使用分光光度計時，是否要經(jīng)常進行儀器波長準確度的檢查 ?答案是否定的。當在日常測定中發(fā)現(xiàn)儀器測定靈敏度下降，這時才應進行波長準確度的檢查，最簡易的檢查方法 (粗檢 )是：儀器開機后，調(diào)節(jié)波長為 580nm，在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙，若能觀察到一長方形 的黃色光斑，說明波長準確度屬正常范圍，否則就應進行波 長校正。

　　當儀器經(jīng)過長途搬運、受過機械振動或更換光源燈泡后， 必須進行波長準確度的檢查與校正。粗檢同上，其校正方法 有：干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發(fā)射線校正法。具體步驟可參考儀器使用說明書。

　　3關于吸收池的使用問題

　　按照吸收池使用的基本順序分說如下：

　　(1)吸收池的潤洗

　　吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗 2～3遍，潤洗前是否 要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區(qū)別對待。

　　如果初次用干的吸收池裝待測液 (特別是有色溶液)時， 從維護保養(yǎng)吸收池的角度講，為減小其干玻面對顏色的吸附能力，便于用后吸收池的清洗，建議先用純水潤洗一遍，再用待裝溶液潤洗 2～3遍；若后再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液 (如從小到大測定標準系列溶液的吸光度)時， 可直接用待裝溶液潤洗2～3遍即可。

　　標準曲線法定量時，如果是先測定標準系列溶液的吸光度，當測到樣品溶液時，由于測定的樣品溶液濃度比最后一 個標準溶液的濃度低或不可知時，建議先用純水潤洗一遍， 再用待裝溶液潤洗 2～3遍。

　　(2)吸收池的裝液、擦拭與放置 吸收池潤洗完成后注入待測溶液至池高的 2/3~3/4處。

　　(3)吸收池成套性檢驗及處理 新吸收池或吸收池使用一段時間后都必須進行成套性檢驗.

　　4關于吸光度測定重復性的問題

　　分光光度計在測定過程中，發(fā)現(xiàn)同一個溶液在不同時問里其測定結(jié)果不同，即重復性不好，其原因是什么?排除測定錯誤因素外，可 能原因有：

　　(1)儀器預熱時間不夠或預熱方法不對所造成，應延長預熱時間或采用正確的預熱方法。

　　(2)光電轉(zhuǎn)換器 (如光電管)因長時間使用其光電轉(zhuǎn)換 效率發(fā)生了變化導致。這時標準溶液與待測溶液的吸光度都 同樣變低，在相對定量時對結(jié)果影響很小。但是對這類儀器， 一 般建議連續(xù)使用時間不應超過 3h，若需長時間使用，最好間歇 30min 。

　　5其他問題

　　(1)發(fā)現(xiàn)測定過程中的一些不良操作不利于儀器的維護、保養(yǎng)，使用者應盡 可能避免。如在儀器的上方進行操作(如倒溶液)；拿出來的吸收池 (或吸收池架)放在儀器的面 板上；同實驗室不同儀器的吸收池混用等。

　　(2)關于防塵、防潮問題

　　儀器一般都隨機附有一只塑料布罩，不使用時用其罩住整個儀器，這是很好的防塵手段。但發(fā)現(xiàn)很多實驗室里不用附來塑料布罩，而是 自己用一塊普通布或做成布罩來覆蓋儀 器，防塵效果不如塑料布罩理想。另外，在塑料布罩只放入數(shù)袋防潮硅膠，也能更好起到延長防潮的功效。在防潮時， 如果儀器設有防潮干燥筒的，應經(jīng)常檢查，發(fā)現(xiàn)變色立即更 換新的或加以烘干再用。

　　長期停用的分光光度計，要定期開機除潮，如每隔一個 月通電預熱半小時，以保持整機呈干燥狀態(tài)，并且維持電子元件的性能 。